大鼠PPARγ shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

作者：叶宽萍; 王少华; 孙子林; 黄艳

来源：江苏医药, 2011, (13): 1528-1531.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2011.13.014

• 过氧化物酶体增殖激活受体γ
• RNA干扰
• 慢病毒载体 Peroxisome proliferators-activated receptor γ
• RNA interference
• Lentiviral vector

目的构建过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)基因RNA干扰慢病毒载体并鉴定。方法设计针对PPARγ的小发夹RNA(shRNA)序列,应用基因重组技术插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,XbaⅠ和XhoⅠ双酶切和DNA测序鉴定重组克隆。将pLL3.7空载体(NC组)、pLL-PPAR-γsh1RNA(S1组)、pLL-PPAR-γsh2RNA(S2组)三组质粒分别与辅助包装质粒共转染人胚肾293T细胞,并测定病毒滴度;病毒感染大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞和大鼠海马神经干细胞后,分别用RT-PCR和Western blot检测PPARγmRNA和蛋白表达。结果 PP...

• 单位
  东南大学附属中大医院