基于网络药理学预测肝岩舒方抗肝癌有效成分及机制

作者：王殷东; 龚亚斌; 孙璐; 俞洋; 徐振晔^*

来源：中医肿瘤学杂志, 2023, 5(06): 87-100.

DOI：10.19811/j.cnki.ISSN2096-6628.2023.11.014

• 网络药理学
• 肝岩舒方
• 原发性肝癌
• 作用机制

目的 基于网络药理学探讨肝岩舒方治疗原发性肝癌的活性成分、作用靶点、信号通路等，并验证肝岩舒方对肝癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法 通过3种数据库获得肝癌疾病靶点，以及肝岩舒方10味中药的活性成分，筛选出各中药有效化合物所对应的药物靶点，分析获得药物成分-疾病共同靶点，绘制蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络，构建肝岩舒方中药-化合物成分网络图、药物活性成分-作用靶点网络并进行拓扑分析，获得核心靶点。基因本体（Gene Ontology,GO）分析对靶点基因的序列信息进行功能分类分析，京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）分析靶点相关代谢通路。通过体外实验，制备对照组、肝岩舒方组、芪灵蟾组、索拉非尼组、肝岩舒方和索拉非尼联合治疗组的SD大鼠含药血清，CCK-8检测细胞活性，细胞划痕检测细胞迁移水平，Transwell检测各组细胞转移水平，蛋白免疫印迹法（Western Blot,WB）检测各组基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)蛋白表达水平。结果 从肝岩舒方中筛选出167个化合物，与肝癌共有靶点93项，核心靶点10项；在此基础上构建了肝岩舒方的成分-靶点、成分-肝癌疾病靶点及相关信号通路的共同表达网络，同时筛选出与肝岩舒方关键成分相关的主要信号通路，发现肝岩舒方可能通过叉头框转录因子O(forkhead transcription factor O,FOXO)信号通路、AGE-RAGE信号通路等对肝癌起治疗作用。CCK-8实验中，给药48小时后肝岩舒方能使肝癌细胞HepG2的增殖受到抑制，而后选取20%浓度处理细胞。划痕试验结果显示：与对照组相比，肝岩舒方组HepG2细胞在48 h时迁移水平显著降低（P<0.05）。Transwell实验显示：与对照组相比，肝岩舒方和西药联合治疗组的细胞转移水平降低（P<0.05）；与肝岩舒方组及西药组相比，肝岩舒方和西药联合治疗组的细胞转移水平显著降低（P<0.001）。WB检测细胞中MMP-2的表达显示：与单一药物治疗相比，肝岩舒方和西药联合治疗下MMP-2表达下调。结论 从多角度探索了肝岩舒方治疗原发性肝癌的作用机制，揭示了肝岩舒方的药理作用，为其后续的实验研究及临床疗效指标的筛选提供了方向。

• 单位
  上海中医药大学; 上海中医药大学附属龙华医院; 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院