摘要
目的:观察桃红四物汤对肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌Wnt5a信号表达的影响,从Wnt/Ca2+信号通路角度探讨其作用机制。方法:100只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、桃红四物汤低剂量组、桃红四物汤高剂量组、阻滞剂组,每组20只。除正常组外,其他各组均阻断血流复制右后肢缺血-再灌注损伤模型,各药物组大鼠在造模前分别以相应药物预处理,ELISA检测复灌后0、2、4、8 h大鼠腓肠肌中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,RT-qPCR检测复灌后0、2、4、8 h腓肠肌Wnt5a mRNA的表达,免疫组化检测复灌后8 h腓肠肌中Wnt5a蛋白的阳性表达。结果:HE染色显示缺血-再灌注8 h后,桃红四物汤低剂量组、桃红四物汤高剂量组及阻滞剂组病理形态学优于模型组。不同再灌注时间大鼠腓肠肌IL-1β表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),不存在时间效应;不同再灌注时间大鼠腓肠肌TNF-α、Wnt5a mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),存在时间效应。5组大鼠腓肠肌IL-1β、TNF-α及Wnt5a mRNA表达水平总体比较,差异均有统计学意义(P<0.05),存在分组效应。时间与组别对大鼠腓肠肌IL-1β、TNF-α及Wnt5a mRNA表达水平的影响存在交互作用(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠腓肠肌IL-1β、TNF-α表达升高(P<0.05),Wnt5a蛋白和Wnt5a mRNA表达一致性上调(P<0.05);与模型组比较,阻滞剂组、桃红四物汤低剂量组和桃红四物汤高剂量组大鼠腓肠肌IL-1β、TNF-α表达降低(P<0.05),Wnt5a蛋白和Wnt5a mRNA表达一致性下调(P<0.05),不同再灌注时间(0、2、4、8 h)的结果显示相同的倾向性。结论:Wnt5a信号为大鼠肢体缺血-再灌注骨骼肌损伤的重要信号分子,桃红四物汤干预可在一定程度上下调Wnt5a信号的表达来减轻肢体缺血-再灌注损伤。
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单位湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学