人类表皮生长因子受体-2单链抗体抑制高表达人类表皮生长因子受体-2肿瘤生长

作者：周扬; 刘宁波; 黄飞; 张国敬; 李若彤; 李卫东; 付蔚华

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(07): 1111-1114.

• 人类表皮生长因子受体-2
• 单链抗体
• T6-17细胞株

目的探讨抗人类表皮生长因子受体-2(Her-2)单链抗体(scFv)抑制高表达Her-2的肿瘤细胞生长增殖,探讨其应用于Her-2阳性肿瘤治疗的可行性。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术从携带Her-2-scFv片段的质粒pUC57-Her-2-scFv获得目的基因,双酶切法将目的基因Her-2-scFv插入质粒载体pET28a构建表达质粒,转化入Rosetta大肠杆菌诱导表达,获得目的蛋白,并复性、纯化。Western blot证实表达。噻唑蓝(MTT)法检测目的蛋白对肿瘤细胞T6-17增殖的抑制作用。将肿瘤细胞T6-17在裸鼠皮下成瘤,观察抗Her-2单链抗体抑制肿瘤细胞生长。结果经基因测序鉴定,重组质粒pET28a-Her-2-scFv构建成功。转化入Rosetta菌表达并分离纯化,可获得纯度约为90%的目的蛋白。MTT法测定发现,抗Her-2-scFv组对T6-17细胞的的生长抑制率为33.52%,曲妥珠单抗治疗组的生长抑制率为34.79%,两组比较差异无统计学意义(P=0.429),而与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。进而检测Her-2-scFv对裸鼠肿瘤模型生长抑制作用发现,Her-2-scFv各浓度治疗组均表现出抑瘤效应,100、250、500 ng/kg组的抑瘤率分别为33.7%、27.2%、63.3%,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.027、0.035、0.000)。赫赛汀组抑瘤率为70.2%,与500 ng/kg组比较,差异无统计学意义(P=0.643)。结论抗Her-2单链抗体在体内外均可显著抑制Her-2阳性肿瘤细胞T6-17的生长增殖。

• 单位
  天津医科大学总医院; 邯郸市第一医院