超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱质谱分析沼虾过敏原蛋白

作者：潘晓东^*; 黄百芬; 蔡增轩; 王梦莉; 韩见龙; 陈苘

来源：预防医学, 2020, 32(10): 1010-1017.

DOI：10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2020.10.009

• 超高效液相色谱
• 四极杆静电场轨道离子阱质谱
• 过敏原蛋白
• 虾
• 特征肽段

目的建立超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱质谱法,分析沼虾中的过敏原蛋白。方法基于Bottomup(自下而上)蛋白分析策略,采用Tris-HCl提取罗氏沼虾样品中的目标蛋白,胰蛋白酶40℃消化6 h,肽段经过色谱分离后采用四极杆静电场轨道离子阱质谱(Full MS/dd-MS2监测模式,TopN=10)测定,利用UniProt蛋白数据库和Proteome Discoverer软件鉴定过敏原蛋白。结果获得4种过敏原蛋白,分别为原肌球蛋白、精氨酸激酶、肌浆钙结合蛋白和血蓝蛋白,肽段覆盖率分别为53%、36%、12%和12%,翻译后修饰的位点有天冬氨酸(D)的甲基化,天冬酰氨(N)和谷氨酰氨(Q)的脱酰氨化以及蛋氨酸(M)的氧化。结论超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱质谱能获得丰富的肽段及碎片信息,灵敏度和分辨率较高,可用于虾及虾制品的过敏原蛋白鉴定和分析。

• 单位
  浙江省疾病预防控制中心