大豆症青相关病毒CP蛋白的抗血清的制备及检测应用

作者：张玉阳; 李庆伦; 于连伟; 谢莉娜; 姜兴林; 王贺; 李洪连; 施艳; 杨雪; 袁虹霞

来源：植物病理学报, 2024, 54(03): 555-560.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.001332

• 大豆症青相关病毒
• 大豆症青
• 外壳蛋白
• 原核表达
• 抗血清

大豆症青相关病毒(soybean stay-green associated virus, SoSGV)是新发现的一种可以引起大豆症青的植物病毒。大豆症青在中国大豆产区广泛发生流行，严重威胁大豆产业的健康发展，因此建立快速有效的SoSGV检测方法对于大豆症青的监测和防控具有重要意义。本研究依据SoSGV外壳蛋白(coat protein, CP)基因的核苷酸序列设计引物，从发病大豆中扩增得到786 bp的目的基因，将其克隆到原核表达载体pET-28a上，获得重组载体pET-28a-CP。在大肠杆菌Rosseta菌株中经过IPTG诱导表达，获得30 kDa的蛋白，与预期SoSGV CP大小一致。以纯化后SoSGV CP蛋白为抗原，免疫小鼠，制备了特异性SoSGV CP抗血清。In-ELISA检测结果表明，血清效价≥3.2×10～4。Western blot分析表明所制备的SoSGV CP抗体可以在SoSGV侵染的烟草叶片和大豆症青发病的大豆叶片中检测到30 kDa的特异性条带。本研究为SoSGV引起的大豆症青的快速检测提供了重要的技术支撑。

• 单位
  河南农业大学