摘要
基于线粒体自噬和内质网应激,探究黑果枸杞提取物(Lycium ruthenicum Murray extraction,LRME)对Hep G2细胞自噬的调控作用.采用流式细胞术检测Hep G2细胞周期,通过q RT-PCR和Western blot测定内质网应激、线粒体自噬和自噬关键基因的表达水平.结果表明:Hep G2细胞G0/G1期向S期的转化过程被LRME有效抑制;LRME极显著上调肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和AMP依赖的蛋白激酶(adenosine 5'-monophosphateactivated protein kinase,AMPK),并显著下调细胞周期蛋白D1(cyclin D1,CCND1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、周期素依赖性激酶-4(cyclin-dependent kinase-4,CDK4)和哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin,m TOR)的m RNA水平;上调内质网转录激活子4(activating transcription factor 4,ATF4)和FUN14域蛋白1(FUN14 domain containing 1,FUNDC1)的m RNA和蛋白表达.由此推测LRME可通过在体外促进内质网应激和线粒体自噬,进而诱导Hep G2细胞自噬.
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单位青海大学农牧学院