科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的探讨芪玉三龙汤（QiyuSanlongDecoction，QYSL）在体外条件下对小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化的调控作用及其对CD4~(+)T细胞、CD8~(+)T细胞的影响。方法1.分离培养小鼠腹腔巨噬细胞，并通过流式细胞术（PE-CD11b/ FITC-F4/80染色）鉴定其纯度。2.采用IL-4刺激小鼠腹腔来源的巨噬细胞构建M2型巨噬细胞模型，芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞，分别于不同时间点应用流式细胞术检测细胞表面膜分子CD16/32、CD206、CD155、PD-L1、Galectin-9的表达；qRT-PCR检测iNOS、IL-12p40、IL-1β、精氨酸酶1（Arginase-1）、发现于炎症区域1（Foundininflammatoryzone1，FIZZ1）、IL-10的表达情况。3.采用芪玉三龙汤处理后的M2型巨噬细胞分别与CD4~(+)T、CD8~(+)T淋巴细胞体外共培养，流式细胞术检测T细胞表面免疫抑制分子T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域(Tcellimmunoglobulinandimmunereceptortyrosine-basedin hibitorymotifdomain，TIGIT)的表达水平。结果1.成功分离出小鼠腹腔巨噬细胞，并鉴定其纯度高达89.8%。2.芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞后，细胞表面膜分子CD16/32的表达不断增加，而CD206表达下调；处理24h后细胞iNOS、IL-12p40及IL-1β基因的mRNA表达水平上升，Arginase-1、FIZZ-1、IL-10基因mRNA表达水平降低；处理24h后细胞表面CD155、PD-L1、Galectin-9分子表达降低。3.经芪玉三龙汤处理的M2型巨噬细胞分别与CD4~(+)T、CD8~(+)T淋巴细胞共培养后，CD4~(+)T和CD8~(+)T细胞表面TIGIT的表达受到明显抑制。结论芪玉三龙汤能够诱导小鼠腹腔M2型巨噬细胞向M1型极化，并且极化后的细胞能够抑制T细胞负性调节分子的表达。
- 单位
