发育性颈椎管狭窄与脊髓型颈椎病血清差异蛋白组学分析

作者：卜献忠; 卜保献; 许伟; 李智斐; 杨汉立; 王微微; 周劲衍; 钟远鸣^*

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(11): 1704-1711.

• 发育性颈椎管狭窄
• 脊髓型颈椎病
• 蛋白组学
• TMT技术
• 差异蛋白
• 血清特异性标志物

背景：课题组前期研究发现气虚血瘀证是脊髓型颈椎病各种中医证型中的主要证型。然而，用于气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄向脊髓型颈椎病转化的早期诊断蛋白组学标志物未见相关报道。目的：探讨发育性颈椎管狭窄与脊髓型颈椎病的血清蛋白组学差异质，寻找并鉴定两者之间的潜在血清生物学标志物。方法：分别采集气虚血瘀证脊髓型颈椎病患者(实验组)血清9例、气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄(对照组)血清9例，选用同位素相对标记与绝对定量技术(TMT)联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术进行蛋白组学分析，以此寻找并鉴定差异表达的蛋白质。结果与结论：(1)TMT技术共筛选出有意义差异蛋白1 027种，最终鉴定出显著性差异蛋白89种(P <0.05)，其中与对照组比较，实验组中α-肌动蛋白4、α-肌动蛋白1、细胞分裂控制蛋白42同系物、整合素连接蛋白激酶、Β-肌动蛋白等45种蛋白表达上调；纤维连接蛋白、纤维蛋白原γ链、纤维蛋白原α链、纤维蛋白原β链等44种蛋白表达下调；(2)基于GO富集分析，这些差异蛋白参与了信号受体结合、激酶结合、蛋白激酶活性、整合素结合、肌动蛋白丝结合等分子功能；(3)KEGG通路分析，筛选20条主要共同差异信号/代谢通路，分别为粘着斑、紧密连接、Rap1信号通路、血小板活化、肌动蛋白细胞骨架的调节等信号通路；(4)PPI分析表明，气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄与脊髓型颈椎病之间的共同差异蛋白中ILK,FGA,FGB,FGG,FN1,CDC42,ACTN1,ACTN4,ACTB等位于蛋白质互作网络的节点，且与骨生成与破坏系统、神经系统、凝血系统、细胞炎症等系统关系密切；(5)结论：采用TMT联合LC-MS/MS技术成功筛选出了气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄与脊髓型颈椎病之间的血清差异表达蛋白质，明确了ILK、FN1、CDC42、ACTN4是气虚血瘀证发育性颈椎管狭窄向脊髓型颈椎病转化的特异性标志物，为进一步阐明其转化机制提供了依据。

• 单位
  广西中医药大学第一附属医院; 省骨科医院; 广西中医药大学; 河南省洛阳正骨医院