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摘要
目的:观察知柏地黄汤对解脲脲原体(UU)感染模型大鼠精子线粒体通透性转化的影响。方法:取SPF级SD雄性大鼠90只,随机分成正常对照组、模型组、中药组(知柏地黄汤)、西药组(强力霉素)、中西组(知柏地黄汤+强力霉素),除正常对照组外,其他组均采用经大鼠膀胱注射UU建立UU感染动物模型。造模成功后,给予对应药物连续灌胃21 d,末次给药24 h后取标本,采用RT-PCR法测定大鼠精子线粒体VDAC2m RNA、ANT4m RNA表达水平,采用Western印迹法检测大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4蛋白表达水平,采用高效液相色谱法检测精子线粒体ATP、ADP、AMP含量。结果:正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西药组大鼠精子VDAC2蛋白表达水平分别为0.626±0.074、0.039±0.011、0.101±0.037、0.236±0.070、0.475±0.064;ANT4蛋白表达水平分别为0.527±0.096、0.044±0.011、0.127±0.040、0.253±0.054、0.367±0.086;模型组大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4蛋白表达水平明显低于正常对照组(P<0.05,P<0.01);西药组、中西组较模型组大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4蛋白表达水平显著升高(P<0.01);西药组、中西组较中药组大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4蛋白表达水平上升显著(P<0.05,P<0.01);中西组较西药组线粒体VDAC2蛋白表达水平上升显著(P<0.01)。正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西药组大鼠精子VDAC2m RNA表达水平分别为0.008±0.001 035、0.000 79±0.000 226、0.002 06±0.000 861、0.003 34±0.000 229、0.004 85±0.000 495;ANT4m RNA表达水平分别为0.026 50±0.003 401、0.001 64±0.000 205、0.005 04±0.002 537、0.008 57±0.000 690、0.013 13±0.000 826;模型组大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4m RNA表达水平明显低于正常对照组(P<0.05,P<0.01);治疗组(中药组、西药组、中西组)大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4m RNA表达水平较模型组显著升高(P<0.01);西药组、中西组较中药组大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4m RNA表达水平显著上升(P<0.01);中西组较西药组大鼠精子VDAC2、ANT4m RNA表达水平显著上升(P<0.01)。正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西药组大鼠精子ATP值分别为(203.41±13.16)、(96.22±12.55)、(101.99±5.97)、(159.44±33.16)、(194.07±9.36)mg/L;ADP值分别为(129.87±14.68)、(99.87±3.28)、(104.99±16.40)、(118.51±12.99)、(121.62±9.41)mg/L;AMP值分别为(149.05±5.65)、(212.53±19.43)、(183.97±12.43)、(160.64±14.19)、(150.21±12.87)mg/L;EC值分别为0.56±0.01、0.36±0.03、0.40±0.01、0.50±0.06、0.55±0.01;与正常对照组比较,模型组大鼠精子ATP及EC值降低,AMP值上升,差异有显著性(P<0.01)。与模型对照组比较,西药组、中西组大鼠精子ATP及EC值上升,AMP值下降,差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。与中西组比较,中药组大鼠精子ATP及EC值下降,AMP值上升,西药组大鼠精子ATP、EC值下降,差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论:UU感染能使大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4蛋白表达水平下降,VDAC2m RNA、ANT4m RNA表达水平降低,使ANT/VDAC的转运异常,进而使线粒体能量代谢异常,ATP、ATP/ADP及EC值下降。知柏地黄汤能够使UU感染大鼠精子线粒体VDAC2、ANT4蛋白表达水平上升,VDAC2m RNA、ANT4m RNA表达水平升高,调控ANT/VDAC蛋白复合体的转运功能,保证了ATP、ADP在线粒体与胞质间的有效转运,提升ATP、ATP/ADP及EC值,维护了大鼠精子线粒体正常的能量代谢。这可能是知柏地黄汤治疗UU感染性不育症的机制之一。
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单位湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学
