hCGβ-C3d3融合蛋白在乳酸杆菌的表达及鉴定

作者：姚晓英; 李大金; 袁敏敏

来源：生殖医学杂志, 2006, (05): 308-312.

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2006.05.006

• 重组乳酸杆菌
• hCGβ-C3d3
• 电穿孔转化
• 免疫避孕

目的探讨融合基因人绒毛膜促性腺激素(hCG)-βC3d3在干酪乳酸杆菌有效表达,为研究携hCG-βC3d3融合基因的乳酸杆菌直接黏膜免疫奠定基础。方法用分子生物学技术构建质粒pIlac.hCG-βC3d3,电穿孔转化干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)CECT 5276,挑选转化后的耐药菌落,在含红霉素的MRS培养基中培养,0.5%乳糖诱导后,在不同时间取上清,化学发光法检测hCGβ,免疫细胞化学鉴定融合蛋白。结果经测序证实目的基因构建正确。免疫化学发光测定显示,转化成功的重组干酪乳酸杆菌在乳糖的诱导下可分泌hCGβ。免疫细胞化学鉴定显示hCGβ与C3d3融合成功。结论实现了重组乳酸杆菌Lb.hCG-βC3d3分泌性表达融合蛋白hCG-βC3d3。

• 单位
  复旦大学