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摘要
鉴定番荔枝ARF家族基因，并分析其在花发育中的表达谱，为深入探索ARF家族基因调控花发育的机制奠定基础，为解决番荔枝产业上出现的“花而不实”、结果率低等问题提供理论依据。以番荔枝为研究对象，基于转录组测序，筛选鉴定出11个番荔枝AsARF基因。通过同源进化分析、蛋白结构域分析、亚细胞定位、qRT-PCR等技术，初步分析了AsARF家族基因的生物学功能。进化树分析结果显示，AsARF蛋白可以被分为5组。AsARF的预测蛋白分子量在73.85～112.51 kDa之间，等电点分布于5.42～7.63之间。所有AsARF蛋白均含有1个DNA结合结构域和1个中间区域结构域，除AsARF3a、AsARF6a和AsARF6b外，其他蛋白还存在1个C-末端二聚化结构域。基于蛋白中间区域的氨基酸富集情况，推测AsARF5a、AsARF5b、AsARF6c、AsARF6d、AsARF7和AsARF16这6个蛋白可能为转录激活子，而AsARF2、AsARF3a、AsARF3b、AsARF6a和AsARF6b这5个蛋白推测为转录抑制子。鉴定得到3个CTD结构域缺失的ARF基因：AsARF3a、AsARF6a和AsARF6b，它们可能有着独特的生物学功能。亚细胞定位预测结果显示，AsARF蛋白主要定位在细胞核中。亚细胞定位实验结果显示，AsARF2、AsARF3a和AsARF6a蛋白定位于细胞核，表明AsARF蛋白具有转录因子的核定位特征。qRT-PCR结果显示，AsARF3a、AsARF3b、AsARF5a、AsARF5b、AsARF6a和AsARF7在花芽期表达量最高，AsARF2和AsARF6b的表达量在花蕾期最高。AsARF2、AsARF3a、AsARF5a、AsARF5b、AsARF6b、AsARF6c和AsARF16基因在正常花中的呈现高表达，而AsARF3b、AsARF6a、AsARF6d和AsARF7则在畸形花中表达量更高。AsARF6b、AsARF6c在正常花中表达量高、而AsARF6a、AsARF6d在畸形花中表达量更高，说明它们在花的正常发育中起到了重要作用。
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