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摘要
从豆瓣酱中筛选的一株能高效降解亚硝酸盐的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)LJ01,将其nir基因克隆至相应的表达载体上,构建了重组菌pET-28a(+)-nir-BL21。为提高基因工程菌pET-28a(+)-nir-BL21的产亚硝酸盐还原酶(NiR)水平,对重组菌pET-28a(+)-nir-BL21的培养基组成通过单因素实验、Plackett-Burman和Box-Behnken试验优化。结果表明,获得最佳培养基为:以液体LB培养基为基础培养基,再添加葡萄糖3.72 g·L-1、甘油2.63 g·L-1和细菌学蛋白胨8.70 g·L-1,活菌数预测值为3.14×108 CFU·mL-1,通过验证得3.02×108 CFU·mL-1,与预测值接近。本实验构建的高产亚硝酸盐还原酶的菌株,将为日后降解食品中的亚硝酸盐进行工业化应用提供理论基础。
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