重齿毛当归ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者：郭晓亮^*; 段媛媛; 郭杰; 游景茂; 王澳炎; 朱建波

来源：分子植物育种, 2022, 20(08): 2682-2688.

DOI：10.13271/j.mpb.020.002682

• 重齿毛当归
• ISSR-PCR
• 体系优化

本研究在均匀设计的基础上，采用单因素试验进行优化，探寻重齿毛当归进行ISSR-PCR扩增时各组分(即引物, 2×Taq Master Mix,模板DNA)的最佳用量，建立重齿毛当归ISSR-PCR扩增体系。筛选的最佳体系为：在20μL的体系中，2×Taq Master Mix:11.4μL、DNA:9.04 ng、引物：0.325μmol/L。同时，还筛选出3条多态性较好、条带稳定的引物(UBC807, UBC810, UBC812)。在此基础上，进行ISSR-PCR扩增验证，结果表明该反应体系扩增效果好，稳定性强，为重齿毛当归的种质资源评价、物种真伪鉴定等提供了一种新的分子标记方法。

• 单位
  湖北省农业科学院中药材研究所; 湖北民族大学