一种肠杆菌科细菌菌影的高效制备方法

作者：马毅; 朱文君; 王菊芳

来源：2022-06-22, 中国, ZL202210710693.8.

本发明属于微生物学和基因工程领域,公开了一种肠杆菌科细菌菌影的高效制备方法,包括以下步骤：采用RF克隆方法将噬菌体ID52裂解基因E与温控载体连接,构建温控重组质粒；将所述重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞中,以氯霉素为抗性筛选,得到重组大肠杆菌单克隆；将得到的重组大肠杆菌单克隆接种至含有氯霉素的LB液体培养基中振荡培养；当菌液OD-(600)值达到0.8以上时,诱导裂解基因E表达,最后收集诱导表达后的菌影。本发明噬菌体ID52-E裂解蛋白的裂解活性更强,菌影形成率更高。当起始诱导OD-(600)值达到2.0时,加入诱导剂L-阿拉伯糖,其OD-(600)值可降低至0.3-0.4,本发明显著提高了菌影的产量。

• 单位
  华南理工大学