昼夜节律颠倒对小鼠角膜上皮创伤修复的影响

作者：何靖新; 林妍; 徐鹏洋; 薛芸霞^*; 李志杰

来源：中华实验眼科杂志, 2019, 37(07): 514-520.

DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2019.07.004

• 角膜
• 昼夜节律颠倒
• 创伤修复
• 炎症反应

目的 探究昼夜节律颠倒对角膜上皮创伤修复的影响。方法 选取6～8周龄C57BL/6雄性小鼠90只,按照随机数字表法分为昼夜节律正常(LD)组和昼夜节律颠倒(DL)组。置于昼夜节律箱中饲养12 d,在小鼠角膜中央标记直径为2 mm的圆形区域,用高尔夫样刀刮除标记区域上皮层,分别使用荧光素钠、苏木精－伊红染色观察并记录角膜再上皮化过程。使用DAPI、FITC标记抗鼠Ly6G抗体和PE标记抗鼠γδTCR抗体进行免疫荧光染色,每隔6 h观察角膜创伤后细胞分裂、中性粒细胞和γδT细胞数量的动态变化,直至42 h。结果 角膜上皮创伤后0、6、12、18和24 h LD组角膜上皮缺损面积百分比分别为(100.000±0.000)%、(37.677±5.243)%、(14.959±1.739)%和(0.000±0.000)%,DL组角膜上皮缺损面积百分比分别为(100.000±0.000)%、(10.967±1.065)%、(1.985±0.106)%和(0.000±0.000)%,总体比较差异有统计学意义(F＝213.718,P＝0.000)。角膜上皮创伤前,DL组和LD组角膜上皮层厚度分别为(33.983±1.074)μm和(33.993±0.904)μm,差异无统计学意义(P>0.05)；角膜上皮损伤后24 h,DL组角膜上皮厚度为(19.473±0.856)μm,明显大于LD组(17.485±0.718)μm,差异有统计学意义(P<0.05)。苏木精－伊红染色显示,创伤24 h后2个组小鼠角膜上皮细胞皆排列疏松、紊乱、形态不规则。LD组角膜上皮主要为基底细胞,DL组除了基底细胞外,还有少量扁平细胞。角膜上皮创伤后LD组和DL组上皮分裂细胞数量、中性粒细胞数量和γδT细胞数量总体比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 昼夜节律颠倒可通过促进角膜上皮分裂细胞、中性粒细胞和γδT细胞募集高峰期提前,进而调节角膜上皮创伤修复过程。

• 单位
  基础医学院; 暨南大学