脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞中microRNA-146a与TNF-α的相关性研究

作者：曾振国; 龚洪翰; 李勇; 聂贞蕴; 揭克敏; 詹以安; 聂成; 刘芬; 丁成志; 邵强; 卿城; 朱白鹭; 钱克俭

来源：中华急诊医学杂志, 2012, (07): 709-712.

• microRNA-146a
• 肺泡巨噬细胞
• 肿瘤坏死因子-α
• 实时荧光定量PCR
• 炎症

目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和microRNA-146a在脂多糖(LPS)诱导的NR8383肺泡巨噬细胞中的动态表达,分析二者在时间上的变化关系,探讨microRNA-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用及其机制。方法体外培养的肺泡巨噬细胞接种于六孔板,贴壁后加入1μgmL的LPS,刺激0、3、6、12 h后离心收集培养上清液和细胞。采用实时荧光定量PCR检测细胞中microRNA-146a和TNF-αmRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养上清液中TNF-α蛋白水平的表达。microRNA-146a和TNF-αmRNA的相关性采用双变量Pearson相关性分析。结果 (1)培养上清液中的TNF-α蛋白在LPS刺激3 h后显著升高[(359.80±57.54)pg/mL,P<0.01],于12 h达高峰[(729.22±50.40)pg/ml,P<0.01];(2)LPS刺激3 h后,细胞中TNF-αmRNA的表达即达到顶峰[(67.48±24.52)倍,P<0.01],6 h后开始降低[(29.53±4.26)倍,P<0.05];(3)LPS刺激6 h后,microRNA-146a表达水平显著增高[(5.33±0.81)倍,P<0.01],并且持续增高[12 h:(8.21±1.19)倍,P<0.01];(4)细胞中microRNA-146a的表达水平与TNF-αmRNA的含量呈负相关(r=-0.895,P<0.01)。结论在LPS诱导的肺泡巨噬细胞中,microRNA-146a的表达水平与TNF-αmRNA的含量呈负相关,推测microRNA-146a可能参与了肺泡巨噬细胞的炎症反应调控。

• 单位
  南昌大学医学院; 南昌大学第一附属医院; 丰城市中医院心脑血管科