甘露糖结合凝集素对肠上皮细胞凋亡的调控作用及机制研究

作者：许超; 彭科; 王文生; 于敏; 孙力华; 杨桦

来源：局解手术学杂志, 2015, 24(03): 237-241.

• 甘露糖结合凝集素
• Bax
• Bcl-2
• 凋亡
• P38

目的探讨重组甘露糖结合凝集素(recombinant human mannose-binding lectin,rh MBL)对Caco-2细胞凋亡的影响及其机制。方法取14只C57小鼠,随机分为2组。经腹腔注射LPS,构建肠黏膜炎症损伤模型。通过免疫组化和RT-PCR观察甘露糖结合凝集素(MBL)的变化情况,使用TUNEL法检测肠上皮细胞凋亡情况。体外以0、5、10、20μg/m L的rh MBL处理Caco-2细胞,流式细胞术分析Caco-2细胞的凋亡情况,Western blotting和Real-Time PCR检测Caco-2细胞中Bax、Bcl-2基因和蛋白的表达情况,用Western blotting观察MAPK信号通路的变化并探讨其机制。结果经LPS刺激后,免疫组化和PCR观察到MBL在肠上皮细胞的表达增多,TUNEL染色显示肠上皮细胞凋亡增加。在体外不同浓度的rh MBL处理Caco-2细胞48 h后,20μg/m L rh MBL组的早期凋亡率高于其余组。选取20μg/m L的rh MBL以不同时间处理Caco-2细胞后,早期凋亡率增加。经20μg/m L处理48 h后,与对照组相比Bax/Bcl-2蛋白和基因表达比值升高,同时磷酸化P38、ERK蛋白表达增加。给予P38、ERK通路抑制剂后,与20μg/m L相比P38抑制剂能部分使Bax/Bcl-2蛋白表达比值降低,早期凋亡减少。结论高浓度rh MBL可促进肠上皮细胞细胞凋亡,并提示rh MBL可能是通过P38 MAPK途径参与细胞凋亡的调控。

• 单位
  第三军医大学新桥医院