肝癌标志物高尔基体蛋白73基因在大肠杆菌中的表达

作者：张向颖; 刘芳; 谢立; 娄金丽; 刘凯; 陈德喜; 修冰水; 张贺秋

来源：北京医学, 2011, (12): 977-980.

DOI：10.15932/j.0253-9713.2011.12.029

• 高尔基体蛋白73
• 克隆表达 Golgi protein 73(GP73) Clone and express

目的克隆、表达和鉴定肝癌标志物高尔基体蛋白73(GP73)基因序列(1028~1327bp)。方法应用Biosun生物学软件分析GP73全序列,预测其抗原表位,将GP73蛋白基因克隆到表达载体PGEX-4T-2上,构建重组表达质粒PGEX-4T-2/GP73,转化大肠杆菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)诱导表达,利用GST亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用蛋白印迹分析技术(Western blot)和酶联免疫吸附测定方法(ELISA)检测其抗原性,并与商品化的GP73抗原进行比较。结果本研究纯化的GP73蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所; 首都医科大学附属北京佑安医院; 北京市肝病研究所