离心速率对大鼠心肌细胞线粒体提取质量的影响

作者：何玛莉; 李心雨; 于睿; 皮佳仪; 孙雅涵; 徐森; 韩学超; 田炜; 徐菁蔓^*

来源：华北理工大学学报(医学版), 2019, 21(02): 85-90.

DOI：10.19539/j.cnki.2095-2694.2019.02.001

• 线粒体分离
• 线粒体纯度
• 线粒体功能

①目的探讨不同提取方案对心肌细胞线粒体质量的影响。②方法在体外用Langendorff法灌注雄性Wistar大鼠心脏,取左心室组织并分离线粒体; Western blot法检测确定分离线粒体的纯度,透射电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)检测分离线粒体的结构形态,线粒体呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR)测定分离线粒体的功能。③结果当分离转速为3500g时,与12000g相比,分离得到的线粒体Tubulin蛋白和COXⅣ蛋白表达均较低,表明低转速能够提高分离线粒体的纯度。与此结果一致,电镜结果显示与3500g组相比,12000g组可见较多微丝微管结构及线粒体内外膜分离。与12000g组相比,3500g组Ⅲ态呼吸及RCR值明显增高,表明低转速分离获得的线粒体呼吸功能增强。④结论低转速不仅可以提高分离线粒体的纯度,而且有利于维持分离线粒体的正常结构和功能。

• 单位
  华北理工大学