miR-144-3p靶向ONECUT2抑制肺癌细胞迁移、侵袭的实验研究

作者:鲁战胜; 刘波; 孙勇攀; 孔德淼; 姚静; 周小江; 许川; 罗猛; 张庆斌
来源:临床肿瘤学杂志, 2019, 24(09): 774-778.

摘要

目的分析miR-144-3p对肺癌细胞迁移和侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测肺癌NCI-H460细胞、正常支气管上皮细胞HBE中miR-144-3p、ONECUT2的表达;采用脂质体法将miR-144-3p mimics(miR-144-3p组)、miR-NC(miR-NC组)、si-con(si-con组)、si-ONECUT2(si-ONECUT2组)、miR-144-3p mimics和pcDNA(miR-144-3p+pcDNA组)、miR-144-3p mimics和pcDNA-ONECUT2(miR-144-3p+pcDNA-ONECUT2组)转染至NCI-H460细胞;Transwell法检测各组细胞的迁移、侵袭能力;Western blotting检测各组ONECUT2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测miR-144-3p和ONECUT2的靶向关系。结果与HBE组比较,NCI-H460组细胞中miR-144-3p表达显著降低,ONECUT2表达显著升高(P<0.05)。过表达miR-144-3p、沉默ONECUT2均可明显抑制NCI-H460细胞的迁移和侵袭能力,上调E-cadherin蛋白表达,下调N-cadherin、Vimentin蛋白表达;miR-144-3p可抑制野生型ONECUT2 3’-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型ONECUT2 3’-UTR-MUT的荧光素酶活性无影响。过表达ONECUT2可逆转miR-144-3p对NCI-H460细胞的EMT相关蛋白表达。结论 miR-144-3p过表达可抑制肺癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与靶向ONECUT2抑制EMT有关,可为肺癌的治疗提供参考。

  • 单位
    贵州省人民医院