兔膜联蛋白A1基因短发夹RNA慢病毒载体构建与RNA干扰效率的鉴定

作者：梁博伟; 潘新元; 赵劲民; 殷国前; 胡峰

来源：中国组织工程研究, 2012, (11): 1954-1958.

• 膜联蛋白A1
• 短发夹RNA
• 慢病毒载体
• RNA干扰
• 成骨细胞

背景:膜联蛋白A1参与细胞凋亡的调控。目的:针对兔膜联蛋白A1基因构建短发夹RNA慢病毒载体,并检测其对成骨细胞的沉默效率。方法:针对兔膜联蛋白A1基因设计RNA干扰靶序列,合成Oligo DNA,退火形成双链DNA,与BamHI和EcoRI双酶切后的pGLV/H1/GFP载体连接成pGLV-shANXA1,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。pGLV-shANXA1和pGLV/helper-1、pGLV/helper-2、pGLV/helper-3共转染293FT细胞包装产生慢病毒颗粒LV-shANXA1,并测定其滴度,随后将LV-shANXA1感染兔成骨细胞。结果与结论:经PCR和测序证实构建片...

• 单位
  广西医科大学第一附属医院