三种HLA—A/0201限制性表位肽尤文肉瘤树突状细胞疫苗的抗肿瘤免疫作用

作者：彭伟; 黄迅悟; 赵伟鹏; 赵铭; 杨大志

来源：中国骨与关节杂志, 2014, 3(10): 786-790.

DOI：10.3969/j.issn.2095-252X.2014.10.015

• 肽类
• 药物筛选试验,抗肿瘤
• 抗肿瘤药
• 限制性表位肽
• 尤文肉瘤

目的比较不同EWS/FLI-1蛋白HLA-A/0201限制性表位肽对尤文肉瘤树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗的抗肿瘤作用。方法综合运用BIMAS、SYFPEITHI软件筛选与人白细胞抗原HLA-A/0201结合力强的EWS/FLI-1蛋白9肽表位,并合成其表位肽。采用4 h标准51Cr释放实验检测刺激细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对肿瘤细胞的杀伤效应。应用酶联免疫斑点法(enzyme linked immunospot assay,ELISPOT)检测表位肽对DC疫苗刺激的效应细胞γ-干扰素(interferon,IFN-γ)的释放。在此基础上,进行免疫治疗的动物实验,比较其体内抗肿瘤作用。结果筛选出EWS 306、EWS 289及EWS 401与HLA-A/0201具较强的结合性,其合成出的表位肽分别为:QLWQFLLEL(EWS 306)、ILGPTSSRL(EWS 289)和SMYKYPSDI(EWS 401。3组表位肽均有较强的杀伤力,当效-靶比为50:1时,杀伤率EWS306组(20.2±1.8)%、EWS 289组(12.6±0.3)%、EWS 401组(11.9±0.2)%,而对照组为(6.7±0.1)%;当效-靶比为100:1时,表位肽的三组杀伤作用明显提升,杀伤率EWS 306组最高为(51.2±3.7)%、EWS 289组(24.6±2.1)%、EWS 401组(17.8±0.9)%,对照组为(7.2±0.2)%。EWS 306组同其它组比较,差异有统计学(P<0.05。EWS 306组分泌的IFN-γ为(118.3±3.6)个点明显高于EWS401组(35.1±1.0)个和EWS289组(34.2±0.9)个,对照组为(5.0±0.1)个(P<0.05。EWS 306组肿瘤的体积(978.9±28.2)mm3明显小于阴性对照组(1992.9±16.1)mm3和空白对照组(2001.9±12.3)mm3(P<0.05。接种后第35天,EWS 306组存活率为80%大于空白对照组为0%、阴性对照组为10%(P<0.05);接种后第40天,空白对照组降为0%,EWS 306组为80%明显大于和2个对照组(P<0.05。结论 EWS/FLI-1蛋白表位肽中EWS 306较EWS 289和EWS 401对DC的抗肿瘤作用更强,能够有效激活CTLs对肿瘤细胞的杀伤效应,为尤文肉瘤的免疫治疗提供了新的方向。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院; 解放军第309医院; 天津医科大学