禽波氏杆菌16S rRNA和ompA基因双重PCR检测方法的建立

作者:袁朋; 伊惠; 李宇; 崔晨晨; 马春雨; 黄莎茫; 张潇月; 朱瑞良; 杨萍萍*
来源:动物医学进展, 2020, 41(04): 8-11.
DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.04.002

摘要

根据GenBank中登录的禽波氏杆菌(B.avium)16S rRNA和ompA基因序列设计引物,经PCR反应条件优化,建立了检测禽波氏杆菌的双重PCR方法。该方法能够同时扩增B.avium基因组中的16S rRNA和ompA基因的特异序列,而对禽源大肠埃希菌(Escherichia coli)、沙门菌(Salmonella)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)等菌株的扩增结果均为阴性。该方法对B.avium基因组DNA检测的敏感性可达1.25×104 copies/μL,对其菌液检测的敏感性可达1.2×103 cfu/mL,对临床样品的检测结果表明,建立的双重PCR方法与16S rRNA单一PCR检测方法符合率为100%。建立的双重PCR检测方法为B.avium的检测提供了快速、准确、灵敏、特异的检测方法。

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