穿心莲内酯通过下调miR-342-3p抑制结核分枝杆菌感染的巨噬细胞焦亡

作者：王欢; 金慧敏

来源：广州中医药大学学报, 2023, 40(11): 2860-2866.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2023.11.026

• 穿心莲内酯
• 结核分枝杆菌
• miR-342-3p
• 细胞焦亡
• 巨噬细胞

【目的】探讨穿心莲内酯（Andro）是否通过下调miR-342-3p抑制结核分枝杆菌（Mtb）感染的巨噬细胞焦亡。【方法】构建Mtb H37Ra感染的小鼠RAW264.7巨噬细胞模型。实验分5组：Control组（对照组）为未作处理的巨噬细胞；Mtb组为经Mtb感染的巨噬细胞；Mtb+Andro组为巨噬细胞经Mtb感染后，给予Andro处理；Mtb+Andro+miR-NC组或Andro+Mtb+miR-342-3p组为巨噬细胞经Mtb和Andro联合处理后，分别转染miR-NC或miR-342-3p mimic。各组处理后，利用细胞流式术分析细胞凋亡，乳酸脱氢酶（LDH）释放试验检测LDH活性，酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞焦亡相关的炎性因子白细胞介素（IL）-6和IL-18含量，荧光实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法测定miR-342-3p表达，Western Blot法检测GSDMD、Caspase-1、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧化酶1(HO-1)蛋白表达。【结果】与Control组比较，Mtb组和Mtb+Andro组的细胞凋亡率，LDH活力，IL-6、IL-18含量，miR-342-3p表达，GSDMD、Caspase-1、Nrf2及HO-1的蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）；与Mtb组比较，Mtb+Andro组的细胞凋亡率，LDH活力，IL-6、IL-18含量，miR-342-3p表达，GSDMD、Caspase-1、Nrf2及HO-1的蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）。另外，与Mtb+Andro+miR-NC组比较，Mtb+Andro+miR-342-3p组上述指标均升高（P<0.05）。【结论】Andro通过下调miR-342-3p表达，减少Mtb感染的巨噬细胞炎症和细胞焦亡，其分子机制与Nrf2/HO-1通路有关。

• 单位
  黑龙江省传染病防治院