HLA-G基因敲除人滋养层干细胞模型构建

作者：王思东; 程延飞; 曹丹丹; 崔馨元; 庄白妹; 张博伦; 姚元庆^*

来源：生殖医学杂志, 2023, 32(08): 1216-1222.

• 人白细胞抗原G
• 人滋养层干细胞
• 绒毛外滋养细胞
• CRISPR/Cas9

目的 构建人白细胞抗原G(HLA-G)基因敲除的人滋养层干细胞(TSC)模型，初步探究HLA-G对TSC向绒毛外滋养层细胞(EVT)分化的影响。方法 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人TSC的HLA-G基因，将TSC向EVT细胞分化，采用免疫荧光染色及实时定量聚合酶链式反应(qPCR)方法观察HLA-G基因敲除对其标志基因表达的影响。结果 经测序、免疫荧光染色及蛋白质印记法(WB)验证，成功获得了HLA-G基因完全敲除的人TSC细胞系。HLA-G-/--TSC可诱导分化为EVT样细胞，HLA-G-/--EVT的标志基因表达量与野生型相比无显著性差异(P>0.05)。结论 本研究成功构建了稳定的HLA-G基因敲除人TSC模型，且HLA-G并不明显影响EVT的分化过程。

• 单位
  中国人民解放军总医院; 南开大学