分泌型卷曲相关蛋白1在人毛乳头中的表达及其转录机制研究

作者：周蓝波; 丁琦; 曹倩; 冯丹丹; 刘静静; 徐宇轩; 李志瑜; 鲁严; 范卫新^*

来源：临床皮肤科杂志, 2021, 50(01): 12-16.

DOI：10.16761/j.cnki.1000-4963.2021.01.004

• 分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)
• 毛乳头
• 转录机制

目的:探讨人分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1, SFRP1)基因在人毛乳头中的表达及其转录机制。方法:应用免疫组化观察SFRP1在雄激素性秃发(androgenetic alopecia, AGA)患者秃发区的毛囊与非AGA患者的正常毛囊毛乳头部位的表达情况。采用按基因组序列设计的引物,通过PCR克隆人SFRP1启动子片段,将之插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建不同截短片段的重组质粒并瞬时转染毛乳头细胞,测定质粒在毛乳头细胞中的启动子活性,找到核心启动子区域,运用生物信息学方法预测其潜在的转录因子结合位点。结果:免疫组化结果显示AGA患者毛乳头中SFRP1表达量显著高于非AGA患者。经菌液PCR、双酶切、测序,成功构建了人SFRP1启动子及其截短片段重组质粒,并确定其启动子活性区域位于-100～+50bp区域内,且可能含有E2F3、HIF1A::ARNT、FOXC1、SP1等转录因子结合位点。结论:SFRP1在AGA患者毛乳头中表达呈阳性,人SFRP1启动子荧光素酶报告质粒构建成功,其转录因子结合位点初步确定,为进一步的研究奠定基础。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院