镁对猪主动脉瓣间质细胞成骨分化的作用及其机制

作者：吴昊; 李芹; 陈世崧; 徐志云; 刘晓红^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(07): 652-658.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202209001

• 镁
• 主动脉瓣间质细胞
• 成骨分化
• 瓣膜钙化

目的 探究镁对猪主动脉瓣间质细胞(aortic valve interstitial cells, AVICs)成骨分化的调节作用及其潜在机制。方法 采用Ⅱ型胶原酶两步消化法分离培养AVICs,采用免疫荧光染色以及流式细胞术进行表型鉴定。将细胞分为空白对照组(Blank组)、成骨诱导培养基组(OIM组)和镁处理组(浓度为1、2、3 mmol/L MgSO4溶液),分别处理7 d。采用Western blot检测各组细胞中成骨分化标志物骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、RUNT相关转录因子2(RUNX2)表达量的变化；茜素红染色检测各组细胞中钙盐沉积情况；Western blot检测镁对PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号通路的作用情况。结果 AVICs高表达波形蛋白(Vimentin),低表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),不表达CD31,AVICs纯度理想。Western blot结果提示与Blank组相比，OIM组的成骨标志物OPN、RUNX2表达量显著增加(P<0.01);与OIM组相比，3 mmol/L镁处理组可显著降低体外OIM诱导AVICs的OPN和RUNX2表达水平(P<0.01)。茜素红染色可见与Blank组相比，OIM组钙盐沉积明显增加；与OIM组相比，镁处理组能抑制体外OIM诱导的钙盐沉积。Western blot结果提示镁能够显著降低OIM诱导的PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2的磷酸化水平(P<0.01)。结论 镁可能通过调节PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号通路，在一定程度上抑制体外OIM诱导AVICs成骨分化的发生。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学