纳米磁珠免疫层析法检测玉米内州萎蔫病菌

作者：杨金玲; 李莉; 石磊; 刘彩虹; 邹明强; 冯叙桥

来源：植物检疫, 2014, 28(04): 26-31.

DOI：10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2014.04.006

• 纳米磁珠
• 免疫层析试纸条
• 玉米内州萎蔫病菌
• 定量
• 快速检测

基于纳米磁珠标记的免疫层析法,建立快速定量灵敏检测玉米内州萎蔫病菌(Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis,Cmn)的层析试纸条检测方法。用碳二亚胺(EDC)/N-羧基琥珀酰亚胺(NHS)交联法,使玉米内州萎蔫病菌单抗4G12偶联在纳米磁珠表面上,使用喷膜仪将玉米内州萎蔫病菌单抗4H4和羊抗小鼠IgG喷涂于硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,基于双抗夹心法原理建立免疫层析试纸条。通过对检测线上超顺纳米磁珠的磁信号进行检测和结果分析,Cmn抗原最低检测限度为1.0×105 CFU/mL,特异性良好且检测时间缩短为5 min。该方法同时可根据检测线的光学反应进行定性判断,具有操作简便、灵敏度高等优点,并可根据磁信号强度定量检测实际玉米种子样品中Cmn的浓度,为植物病原细菌的快速高效检测提供了一种新型的检测方法。

• 单位
  沈阳农业大学; 江西出入境检验检疫局; 渤海大学; 中国检验检疫科学研究院