葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者：汪滢; 章秀; 吴双秀; 王全喜

来源：上海师范大学学报(自然科学版), 2008, (03): 301-304.

• 葛仙米
• SOD基因克隆
• 诱导表达 Nostoc sphaeroides
• gene cloning of SOD
• induced expression

采用PCR技术从葛仙米(Nostoc sphaeroides)总DNA中克隆了一段基因序列,该序列与基因库中已公布的编码普通念珠藻(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为98%.将该基因插入含T7启动子的质粒pET-32a(+)中构建表达质粒pET-sod,然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,表达菌株用1mmol/LIPTG诱导表达数小时后,产生较多重组的蛋白,且该蛋白以可溶性蛋白形式存在.SDS-PAGE分析表明:在相对分子量约为22kd的位置有一条明显蛋白质带.将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化;NBT光还原法测定表达产物的比活力,每...

• 单位
  上海师范大学