摘要
为探讨悬钩子苷(Rub)对棕榈酸(PA)诱导的小鼠胰岛β细胞(Min6)凋亡的影响,首先利用PA诱导的Min6细胞建立2型糖尿病(T2DM)脂毒性细胞模型,分别给予不同浓度Rub对细胞模型进行干预,分为对照组、模型组、PA+Rub组(PA+12.5μmol/L Rub组、PA+50μmol/L Rub组、PA+100μmol/L Rub组和PA+200μmol/L Rub组)。通过Annexin V-FITC和PI双染流式细胞术检测Rub对PA诱导的Min6细胞凋亡率的影响;采用RT-PCR检测各组细胞凋亡相关基因Caspase 3、Bcl-2和Bax m RNA的表达;通过免疫荧光技术检测Min6细胞内Caspase 9的表达;Western-blot检测Caspase 9、Caspase 3、Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3、Bcl-2和Bax蛋白表达;ELISA法检测胰岛素分泌水平。结果显示,与对照组相比,模型组胰岛素水平及细胞中Bcl-2/Bax m RNA及蛋白表达量均显著降低(P<0.01),细胞凋亡率及细胞中Caspase3 m RNA表达量和Cleaved-Caspase 9/Caspase 9、Cleaved-Caspase 3/Caspase 3蛋白表达量均显著升高(P<0.01)。与模型组相比,PA+Rub组细胞上述指标均发生明显改善,且呈剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。证实Rub具有抑制胰岛β细胞凋亡的作用,其分子机制可能与细胞凋亡的线粒体途径有关。
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