当归补血汤及其主要成分对骨髓抑制小鼠的抗造血细胞凋亡的研究

作者：孔惠敏; 苏伟青; 叶红; 王华; 李亮; 陈卉; 杨默^*

来源：中国实验血液学杂志, 2022, 30(06): 1679-1687.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2022.06.009

• 当归补血汤
• 当归多糖
• 黄芪多糖
• 造血保护
• Meg-01细胞
• 凋亡

目的:探讨当归补血汤(danggui buxue tang, DBT)及其主要成分当归多糖(angelica polysaccharide, APS)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide, ASPS)对骨髓抑制小鼠的造血保护作用和对巨核细胞系Meg-01细胞抗凋亡的机制研究。方法:用4 Gy的137Csγ射线辐照小鼠，建立小鼠骨髓抑制模型。DBT、APS或ASPS(10mg/kg)注射小鼠，在小鼠辐照前(d0)和辐照后d7、14和21对小鼠进行一般状况评估、外周血细胞计数，以及d 21收集小鼠贫血小板血浆检测血小板生成素(TPO)浓度；取d21处死后的小鼠股骨骨髓细胞进行集落细胞形成单位的培养。无血清培养Meg-01细胞24h诱导细胞凋亡，DBT、APS或ASPS处理Meg-01细胞72h后，采用流式细胞术检测细胞的早期凋亡(Annexin V)、线粒体膜电位(JC-1)和凋亡蛋白酶(Caspase-3)的活性。结果:DBT可刺激骨髓抑制小鼠白细胞、红细胞和血小板的恢复，对白细胞和血小板尤为明显(P<0.01,P<0.05)。DBT治疗组小鼠骨髓细胞BFU-E、CFU-MK和CFU-GM的形成数量较对照组明显增多(BFU-E&CFU-GM:P<0.05; CFU-MK:P<0.01)。DBT对小鼠血液中TPO浓度的影响不明显(P=0.89)。与对照组相比，APS组红细胞、白细胞和血小板数均有明显升高(P<0.05);ASPS组白细胞数较对照组明显升高(P<0.05)。CFU培养结果显示，APS可刺激CFU-F、CFU-MK和CFU-GM的形成(P<0.05);而ASPS组只有CFU-GM的数量较对照组增多(P<0.05)。凋亡实验结果显示，DBT可明显降低Meg-01细胞的凋亡(P<0.05)。APS(100μg/ml)处理组Meg-01细胞的早期凋亡率和总死亡率较对照组明显降低(P<0.01,P<0.05);ASPS(100μg/ml)组早期凋亡率较对照组明显降低(P<0.05)。JC-1和Caspase-3结果显示，APS(100μg/ml)处理后，细胞凋亡率明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论:DBT对放射诱导骨髓抑制小鼠的造血系统具有保护作用，尤其是白细胞和血小板；对Meg-01细胞有抗凋亡作用。DBT上述作用主要是由APS引起的，其对抗细胞凋亡的机制主要是通过JC-1和Caspase-3途径进行的。

• 单位
  廉江市人民医院; 中山大学