摘要
目的 探讨miR-506-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法 运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常宫颈细胞Ect1/E6E7和宫颈癌细胞株HeLa、Siha、Caski中miR-506-3p和SPOCK1 mRNA表达水平。双荧光素酶报告基因分析法验证miR-506-3p可能的靶基因。建立miR-506-3p过表达和SPOCK1抑制表达的HeLa细胞株,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HeLa细胞增殖活力,流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率,蛋白质印迹(Western blot)检测SPOCK1、细胞周期调节蛋白(Cyclin D1)、细胞周期蛋白激酶抑制剂(p21)、抗凋亡因子(Bcl-2)、凋亡蛋白(Bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase3)和升高剪切型PARP(Cleaved-PARP)蛋白的表达水平。结果 与Ect1/E6E7细胞相比,宫颈癌细胞HeLa、Siha及Caski中miR-506-3p的表达降低,SPOCK1 mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。SPOCK1是miR-506-3p的靶基因。过表达miR-506-3p或抑制SPOCK1表达可抑制HeLa细胞增殖,促进细胞凋亡,下调Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达,上调p21、Bax、Cleaved-caspase3和Cleaved-PARP蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达SPOCK1可部分逆转miR-506-3p过表达对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。结论 miR-506-3p可通过靶向下调SPOCK1的表达,从而抑制宫颈癌细胞HeLa的增殖,促进其凋亡。
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单位安康市妇幼保健院