靶向金黄色葡萄球菌α溶血素人单链重组抗体的制备及功能鉴定

作者：彭蕾; 叶迎春; 陈涵; 年四季; 吴桐; 于红; 袁青; 邬于川^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2021, 37(12): 1132-1137.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009327

• 重组抗体
• 金黄色葡萄球菌
• α溶血素(α-HL)
• 毒素中和

目的 构建靶向金黄色葡萄球菌α溶血素(α-HL)的全人源重组抗体互补片段融合单链抗体(scFv-Fc),并进行表达及功能鉴定。方法 将前期筛选的抗金黄色葡萄球菌α-HL的全人源scFv538通过同源重组的方式插入pcDNA3.1-人IgG1 Fc质粒，构建成scFv538-Fc/pcDNA3.1重组载体，瞬时转染HEK293F细胞表达重组抗体蛋白并纯化。纯化后的scFv538-Fc抗体通过ELISA检测抗体与金黄色葡萄球菌的结合活性及特异性；CCK-8法检测A549细胞增殖活性以及抗兔红细胞溶血实验验证scFv538-Fc抗体对金黄色葡萄球菌α-HL的中和作用。结果 成功构建了抗金黄色葡萄球菌α-HL的scFv-Fc抗体，HEK293F细胞表达的抗体蛋白相对分子质量(Mr)约为55 000。表达纯化的scFv538-Fc能够特异性和金黄色葡萄球菌α-HL结合，并具备中和金黄色葡萄球菌α-HL的毒性作用，减轻α-HL对A549细胞的毒性作用和对兔红细胞的细胞裂解作用。结论 成功制备有效中和金黄色葡萄球菌α-HL的全人源重组scFv。

• 单位
  基础医学院; 西南医科大学