镍胁迫下安氏伪镖水蚤SSH文库的构建及铁蛋白cDNA的克隆与差异表达

作者：蒋洁兰; 王桂忠; 吴荔生; 李少菁

来源：应用生态学报, 2012, (07): 1973-1978.

DOI：10.13287/j.1001-9332.2012.0239

• 镍
• 安氏伪镖水蚤
• 抑制性消减杂交
• 铁蛋白 nickel
• Pseudodiaptomous annandalei
• suppression subtractive hybridization(SSH)
• ferritin.

为探讨镍胁迫下桡足类的分子响应机制,以安氏伪镖水蚤为研究对象,利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术,构建了镍胁迫下安氏伪镖水蚤SSHcDNA文库,并随机挑取生长菌落140个克隆子,进行菌液PCR鉴定,计算文库重组率为98.6%,文库容量为1.12×106cfu.将重组子测序,经BLAST一致性搜索比对分析发现,有一重组片段含有铁蛋白保守结构域,该片段大小为859bp,连续编码170个氨基酸残基,Gen-Bank登录号为JK312601.半定量PCR证实,镍胁迫24h后,安氏伪镖水蚤中铁蛋白表达显著上调.本文库的成功构建及铁...

• 单位
  近海海洋环境科学国家重点实验室; 厦门大学