人参皂苷Rg1调控内皮祖细胞分泌外泌体及表达血管新生相关miRNAs的影响

作者：熊武; 谭梅鑫; 邹晓玲; 白雪; 朱晨鸿; 梁瑶; 张璐瑶; 张熙^*

来源：时珍国医国药, 2022, 33(02): 277-280.

• 人参皂苷Rg1
• 内皮祖细胞
• 外泌体
• 微小RNA
• 血管新生

目的 探讨人参皂苷Rg1(Ginsenoside-Rg1,G-Rg1)对内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)分泌外泌体(Endothelial progenitor cells derived exosomes, EPC-Exos)及表达血管新生相关微小RNA(MicroRNAs, miRNAs)的影响，为进一步研究G-Rg1介导的EPC-Exos促血管新生的作用机制奠定基础。方法 无菌条件下取正常剖宫产胎盘中的脐带血，分离得到单个核细胞，置于EGM-2培养基传代培养至P3代，通过CD31免疫磁珠分选法及双荧光染色法共同鉴定细胞。将鉴定成功的EPCs随机分为实验组及对照组，实验组用40mg·L~(-1)G-Rg1干预，对照组用等体积PBS液处理，各培养24h。采用超速离心法结合超滤法提取EPC-Exos,通过透射电子显微镜观察其形态，蛋白印迹法鉴定其特征性表面标志物，BCA蛋白定量法检测总蛋白浓度，RT-qPCR法检测各组外泌体中与血管新生相关miRNAs分子的表达。结果 培养24h后，各组EPC-Exos表面标志物CD9、CD63和TSG101的表达均呈阳性。对照组与实验组EPC-Exos总蛋白浓度分别为(0.85±0.02)和(0.97±0.02)ug·uL~(-1),差异显著，有统计学意义(P<0.01)。实验组中部分促血管新生相关miRNAs表达较对照组增多，即miRNA-126-5p、miRNA-146a-5p、miRNA-210、miRNA-214-5p的表达明显增多，差异显著，有统计学意义(P<0.05)。结论 人参皂苷(G-Rg1)能促进内皮祖细胞分泌外泌体，使外泌体中与血管新生相关的miRNA-126-5p、miRNA-146a-5p、miRNA-210、miRNA-214-5p表达明显增多，可进一步从外泌体水平阐释G-Rg1促进血管新生的机制。

• 单位
  湖南省脑科医院; 湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院