基于Th17/IL-17A信号通路探究二冬消渴方缓解2型糖尿病相关干眼大鼠眼表炎症的机制

作者：李佩晨; 石李; 沈乎醒; 孙心怡; 高卫萍^*

来源：中医药信息, 2023, 40(05): 1-31.

DOI：10.19656/j.cnki.1002-2406.20230501

• 二冬消渴方
• 糖尿病相关干眼
• Th17
• IL-17A

目的：通过检测糖尿病相关干眼大鼠角膜及泪腺组织中的辅助性T细胞17(Th17)/白细胞介素-17A(IL-17A)信号通路中相关炎症因子表达情况，初步探讨二冬消渴方治疗糖尿病相关干眼的抗炎机制。方法：将60只SD雄性大鼠(共120只眼)，随机分为空白组，模型组，二冬消渴方低剂量组、中剂量组、高剂量组和普拉洛芬组，每组各10只(20眼)。高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg)建立2型糖尿病动物模型，检测动物双眼角膜泪膜破裂时间(BUT)、荧光素染色(FL)及酚红棉线测试(Prtt)，第12周检测结果证实糖尿病相关干眼动物模型建立成功。二冬消渴方各剂量组分别予不同剂量(5.5、11、22 g/kg)二冬消渴方灌胃，普拉洛芬组给予普拉洛芬滴眼液点眼，各组均连续治疗28 d。分别于实验第0、8、12、14、16周对各组实验动物的FL、BUT、Prtt及随机血糖进行检测。实验第16周处死各组实验动物后，分别取下角膜及泪腺。使用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠角膜及泪腺病理改变；免疫荧光及实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组大鼠角膜和泪腺组织中转化生长因子-β(TGF-β)等基因蛋白表达。结果：干眼指标结果显示，二冬消渴方可延长糖尿病相关干眼大鼠泪膜破裂时间并增加泪液分泌量，降低角膜染色评分(P <0.05,P <0.01)。HE染色结果显示，与空白组比较，模型组大鼠角膜上皮细胞增厚且排列紊乱，基质层水肿，泪腺腺泡大小不一，结构混乱；与模型组比较，二冬消渴方各剂量组角膜水肿减轻，泪腺腺泡排列紧密。免疫荧光结果显示，与模型组比较，二冬消渴方各剂量组实验动物的角膜及泪腺组织中CD4+T细胞与TGF-β的表达量均下调(P <0.05,P <0.01)。qPCR结果显示，二冬消渴方各剂量组大鼠的角膜与泪腺中IL-6、IL-17A及IL-23的表达水平低于模型组(P <0.05,P <0.01)。结论：二冬消渴方对糖尿病相关干眼的抗炎作用机制可能与Th17/IL-17A信号通路密切相关。

• 单位
  南京中医药大学