5-氟尿嘧啶对驴皮成纤维细胞增殖、凋亡的影响

作者：朱春灏; 张媛; 赵玉坤; 曾维斌; 王艳萍^*

来源：黑龙江动物繁殖, 2023, 31(02): 1-6.

DOI：10.19848/j.cnki.ISSN1005-2739.2023.02.0018

• 驴皮
• 成纤维细胞
• 5-氟尿嘧啶(5-FU)
• 胶原蛋白
• TGF-β/Smad通路

试验旨在探讨5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil, 5-FU)对体外培养的驴皮成纤维细胞增殖、凋亡的影响，为5-FU抑制驴皮成纤维细胞的增殖及驴皮伤口愈合机制的研究提供理论依据。试验采用低(10,50μg/mL)、中(100,250,500μg/mL)、高浓度(1 000,1 500,2 000μg/mL)5-FU处理体外培养的驴皮成纤维细胞，用MTT法检测加药处理12,24,48,72,96 h的细胞增殖率，Caspase-3法检测加药处理0,4,8,24,48,72 h的细胞凋亡率，再通过RT-qPCR和ELISA检测添加不同浓度5-FU(10,100,1 000μg/mL)对胶原蛋白合成相关基因表达及蛋白浓度的影响。结果表明：100μg/mL 5-FU处理成纤维细胞24 h增殖率开始显著降低(P<0.05),8 hCaspase-3活性显著升高(P<0.05); RT-qPCR结果显示，5-FU处理24 h可显著抑制胶原蛋白合成相关基因(TGF-β、Smad3、COL1A1、COL1A2、COL3A1)的表达(P<0.05),抑制程度呈剂量依赖性，但100μg/mL 5-FU处理后Smad7的表达量显著高于其他组(P<0.05); ELISA结果显示，100μg/mL 5-FU处理抑制TGF-β、COL1A1、COL3A1蛋白表达的效果最佳(P<0.05)。说明100μg/mL 5-FU处理24 h后，可在抑制体外培养的驴皮成纤维细胞过度增殖的同时，通过调控TGF-β/Smad信号通路，减少合成胶原蛋白相关基因的表达量和蛋白浓度。

• 单位
  动物科技学院; 石河子大学