摘要
目的探讨推拿■法对家兔骨骼肌钝挫伤修复及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法36只健康成年新西兰大耳白兔,随机分为对照组、模型组、■法组(每组12只),再根据不同取材时间点分为1、3、6 d 3个亚组(每组4只)。对照组实验全程正常饲养不予处理。模型组与■法组采用自制改良重力锤打击装置制备骨骼肌钝挫伤模型,于造模成功后7 d开始治疗,滚动频率140次/min,3 min/次,2次/d,共治疗3 d。分别于干预结束后1、3、6 d进行取材。通过HE和Masson染色观察家兔股四头肌病理改变;ELISA检测家兔血清中白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达;Western blot检测家兔股四头肌Wnt3α、β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ,COL-Ⅰ)表达。结果(1)HE和Masson染色结果显示:对照组可见肌纤维排列规整有序,结构完整;模型组肌纤维大小、粗细、形态不一,排列紊乱,间隙增宽,炎细胞浸润、结缔组织增生以及胶原纤维沉积明显;■法组肌纤维无明显变性坏死,结构相对完整,可见少量炎细胞浸润,结缔组织增生与胶原纤维沉积皆明显减少,修复优于模型组。(2)ELISA与Western blot检测结果:与对照组相比,模型组家兔血清IL-6、TNF-α以及股四头肌中Wnt3a、β-catenin、p-GSK-3β、TGF-β1、COL-Ⅰ表达量在1、3、6 d均显著升高(P<0.01),GSK-3β表达量显著降低(P<0.01);与模型组比较,■法组于1、3、6 d家兔血清IL-6、TNF-α与股四头肌中Wnt3a、β-catenin、p-GSK-3β、TGF-β1、COL-Ⅰ表达量皆明显降低(P<0.01),GSK-3β表达量明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论推拿■法能有效减轻骨骼肌损伤后体内炎症反应,减少胶原蛋白沉积,抑制骨骼肌纤维化,进而减轻骨骼肌损伤,促进骨骼肌损伤修复,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活性有关。
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