Pkm2-shRNA真核表达载体的构建和对急性早幼粒细胞白血病耐药细胞株的作用研究

作者：孙明莉; 王冠军; 李江; 崔久嵬; 张爱丽; 王中南; 李晓萌; 李薇

来源：中国实验血液学杂志, 2010, (01): 85-89.

• M2型丙酮酸激酶
• 小发夹结构RNA
• NB4R2细胞
• 急性早幼粒细胞白血病 M2-pyruvate kinase
• shRNA
• NB4R2 cell
• acute promyelocytic leukemia

本研究旨在构建M2型丙酮酸激酶(M2-pyruvate kinase;PKM2)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体,研究特异性沉默pkm2基因对急性早幼粒细胞白血病(APL)耐药性的影响。设计pkm2基因的3个特异shRNA序列,利用基因重组技术将其克隆到含有U6启动子的PBSU6载体上,通过酶切和测序等方法鉴定重组质粒的正确性。利用Western blot方法检测了pkm2-shRNA对急性早幼粒细胞白血病耐药细胞株NB4R2细胞内源性M2-PK蛋白表达的影响,通过NBT还原实验检测了pkm2基因沉默后NB4R2细胞分化情况。结果表明:成功构建了3个有效特异的pkm2-shRNA...

• 单位
  东北师范大学; 吉林大学; 吉林大学第一医院