猪β防御素2成熟肽在酵母中的表达

作者：胡翰; 于宾宾; 何启盖

来源：微生物学报, 2011, (05): 704-709.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2011.05.009

• 猪β防御素2
• 成熟肽
• 真核表达
• 活性实验 Porcine β-defensin-2
• mature peptide
• eukaryotic expression
• activity in vitro

【目的】将猪β防御素2成熟肽基因片段正确整合到酵母基因组染色体上,从而得到稳定的猪β防御素2成熟肽的毕赤酵母表达株。实现猪β防御素2成熟肽的表达。【方法】首先参考酵母偏爱密码子,设计3段引物序列,利用PCR技术扩增得到β防御2成熟肽基因,构建了重组质粒pPIC9k-GST-pBD-2和pPIC9k-pBD-2。将线性化的重组质粒电转化到毕赤酵母KM71细胞中。最后筛选得到酵母阳性克隆,通过不断调节表达条件,实现猪β防御素2成熟肽的表达。【结果】将GST-pBD-2基因序列和pBD-2基因序列分别成功整合到酵母KM71基因组中,重组毕赤酵母工程菌构建成功;重组酵母蛋白GST-pBD-2和PBD-...

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室