GDF11过表达稳转U251细胞株的构建

作者：蔡珊珊; 刘倩; 高丹阳; 杨艺; 邓富家; 王光伟^*

来源：湖南师范大学学报(医学版), 2022, 19(05): 17-20.

• GDF11
• 神经胶质瘤
• 慢病毒
• 稳转细胞株

目的 ：构建过表达生长分化因子11(GDF11)的神经胶质瘤U251稳转细胞株。方法 ：合成GDF11全长序列，构建HBLV-h-GDF11-3×flag-LUC-PURO慢病毒载体。将其与质粒pAX2和pMD2G共同转染293T细胞，收集上清并浓缩，获得慢病毒浓缩液。利用该慢病毒感染U251细胞，经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达GDF11的细胞株，通过RT-PCR鉴定稳转细胞株中GDF11 mRNA的表达水平。结果 ：测序结果与设计序列一致，慢病毒浓缩液滴度为3.0×108 TU/mL,RT-PCR结果显示在该稳转细胞株中GDF11表达水平上调154倍。结论 ：成功构建了稳定过表达GDF11的U251细胞株，为进一步研究GDF11在神经胶质瘤中的作用奠定了基础。

• 单位
  湖南医药学院