小檗胺影响牛病毒性腹泻病毒体外复制的研究

作者：付强; 李泽宇; 贺渊秀; 塞力克·杰恩斯; 李丹; 葛丽娟; 李金月; 谭美玲; 杨莉; 岳剑波; 史慧君

来源：中国动物传染病学报, 2023, 31(04): 33-40.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2023.04.011

• 小檗胺
• 牛病毒性腹泻病毒
• 病毒复制
• 双链RNA

本研究旨在研究天然小分子药物小檗胺（BBM）是否影响牛病毒性腹泻病毒（BVDV）体外复制。分别配制0、1、5、8、10、15、20μmol/L浓度的BBM，使用MTT法检测BBM对MDBK细胞增殖的影响；并选择抑制作用相对较小浓度的BBM处理牛肾细胞（MDBK）8 h后感染BVDV，使用免疫荧光技术检测BVDV双链RNA(ds RNA)含量，确定最佳用药浓度；分别使用实时荧光定量PCR、Reed-Muench法、倒置显微镜观察来检测BBM对BVDV RNA复制、病毒滴度变化、致细胞病变效应（CPE）的影响。结果显示：10μmol/L BBM对BVDV dsRNA积累具有显著性抑制作用，同时该浓度对MDBK细胞的毒性作用较小；同时采取荧光定量PCR检测和滴度测定，发现在72 h内BVDV感染BBM处理的MDBK细胞与对照相比，5'UTR mRNA水平和子代病毒滴度显著性降低，在BVDV感染24 h和36 h时，子代病毒滴度差异性最大；BVDV感染对照组处理的MBDK细胞会造成严重的CPE现象，而BVDV感染BBM处理的细胞CPE现象较弱。以上结果表明，本研究初步验证BBM显著抑制BVDV在细胞中的复制。

• 单位
  新疆农业大学