施他宁对急性胰腺炎腺泡细胞损伤的影响及其作用机制

作者：戚红霞; 熊文坚; 郁海燕; 王璐璐; 黄夕夏

来源：现代医学, 2022, 50(02): 180-186.

• 施他宁
• miR-126-5p
• 急性胰腺炎
• 凋亡
• 氧化应激

目的:探讨施他宁对急性胰腺炎腺泡细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法:雨蛙素(Cerulein)诱导大鼠胰腺腺泡细胞AR42J建立急性胰腺炎模型。AR42J细胞随机分为NC组(空白对照)、Cerulein组(Cerulein处理AR42J细胞)、低剂量组(20μg·ml-1施他宁处理AR42J细胞)、中剂量组(40μg·ml-1施他宁处理AR42J细胞)、高剂量组(80μg·ml-1施他宁处理AR42J细胞)、Cerulein+anti-miR-NC组(anti-miR-NC转染至AR42J细胞后，用Cerulein处理AR42J细胞)、Cerulein+anti-miR-126-5p组(anti-miR-126-5p转染至AR42J细胞后，用Cerulein处理AR42J细胞)、miR-NC+高剂量组(miR-NC转染至AR42J细胞后，用Cerulein和80μg·ml-1施他宁处理AR42J细胞)、miR-126-5p+高剂量组(miR-126-5p mimics转染至AR42J细胞后，用Cerulein和80μg·ml-1施他宁处理AR42J细胞);流式细胞术检测细胞凋亡率；试剂盒检测丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的水平；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-126-5p的表达量；Western blot实验检测B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达量。结果:施他宁处理后，Cerulein诱导的AR42J细胞凋亡率及Bax、Cleaved-caspase-3、磷酸化p65(p-p65)、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)蛋白水平降低(P<0.05),miR-126-5p的表达量及MDA、TNF-α、IL-6的水平降低(P<0.05),Bcl-2的表达量升高(P<0.05),SOD、CAT活性升高(P<0.05);与Cerulein+anti-miR-NC组比较，Cerulein+anti-miR-126-5p组细胞凋亡率及Bax、Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05),MDA、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05),SOD、CAT活性升高(P<0.05);与miR-NC+高剂量组比较，miR-126-5p+高剂量组细胞凋亡率和Bax、Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05),MDA、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平及SOD、CAT活性降低(P<0.05)。结论:施他宁可通过下调miR-126-5p及抑制NF-κB信号通路活化而抑制Cerulein诱导的胰腺腺泡细胞凋亡、氧化应激及炎症反应从而减轻细胞损伤。