摘要

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是引起猪(Sus scrofa)革拉泽氏病(Glasser’s disease)的病原,是临床上危害猪群健康的最为严重的细菌性病原之一。副猪嗜血杆菌血清型众多,其中4型是分离比例最高的血清型,也是危害较为严重的血清型。crp是编码环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)受体蛋白(cAMP receptor protein, CRP)的基因,CRP是最重要的系统调控因子之一,在细菌感染过程中适应环境变化具有重要作用。为了研究crp基因对4型副猪嗜血杆菌生长、抗性和毒力等生物学特性的影响,本研究采用自然转化法构建了4型副猪嗜血杆菌临床分离株HPS4的crp基因缺失株Δcrp,对HPS4及Δcrp的形态、生长特性、生物膜形成、压力耐受、血清杀菌活性、铁利用率和小鼠(Mus musculus)毒力等进行了研究。结果表明,本研究成功构建了4型副猪嗜血杆菌临床分离株HPS4的crp缺失株Δcrp,HPS4的crp基因缺失后,生长显著减慢,生物膜形成能力明显减弱,对渗透压、氧化应激和热应激的耐受能力降低,在血清中的存活能力下降,对铁的利用能力降低,对小鼠的毒力降低。研究结果表明,crp基因对HPS4的生长、抗性和毒力有明显的影响。本研究为进一步探究crp基因的功能,筛选HPS4弱毒株提供基础资料。