快速检测大肠杆菌O157的LAMP方法的建立与评价

作者：张雪寒; 何孔旺; 叶青; 倪艳秀; 温立斌; 李彬; 王小敏; 周俊明; 郭容利

来源：中国兽医学报, 2013, 33(07): 1027-1031.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.07.010

• 环介导恒温扩增技术
• rfbE基因
• 快速检测

利用DNA环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),以rfbE基因为靶序列,设计LAMP引物,建立LAMP反应体系与条件,进行灵敏度和特异性试验。结果显示,整个检测过程仅需1h即可通过肉眼直接目测试验结果。在灵敏度试验中,rfbE-LAMP对O157菌液和模拟阳性样品的最低检测限分别为1CFU/mL和1CFU/g。在特异性试验中,以其他血清型大肠杆菌以及沙门杆菌基因组DNA为模板对rfbE基因进行检测,均没有发生非特异性扩增反应。试验建立的LAMP检测方法具有操作简单安全、检测灵敏度高、特异性高的特点,能够满足基层实验室、应急检测或现场监测等方面的使用需求。

• 单位
  农业部; 江苏省农业科学院