正交试验与单因子双重试验法优化玉米PCR反应体系

作者：江常胜; 朱洪海; 钟永丽; 刘明晓; 东方^*

来源：智慧农业导刊, 2022, 2(21): 14-17.

DOI：10.20028/j.zhnydk.2022.21.005

• 分子育种
• 玉米
• PCR
• 正交试验设计
• 单因子试验
• 体系优化

为探索出玉米PCR反应的最佳体系,解决玉米分子育种工作中基因序列扩增问题,给育种工作提供便利,该文试验以玉米幼嫩叶片为材料,采用正交试验设计法对影响玉米PCR反应的引物用量、模板和模板质量浓度等因素进行3因素4水平优化;对退火温度进行单因子8水平试验优化,通过试验探索出玉米10μLPCR的最佳反应体系为5μL2×EasyTaq?PCR SuperMix(含EasyTaq?DNA Polymerase、dNTPs)、引物0.25μL和1μL40 ng/μL模板DNA,退火温度56.6℃。

• 单位
  中禾生物种业集团有限公司