摘要
过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)辅助激活因子1α(PPARγcoactivator-1α, PGC-1α)作为一个重要的转录激活因子,参与多种生理活动的调节。本研究探究了PGC-1α在斑马鱼(Danio rerio) ZF4细胞(胚胎发育3 d成纤维样细胞)冷应激过程中所起的作用。通过慢病毒质粒转染干扰PGC-1α基因的表达,并用嘌呤霉素筛选得到稳转细胞系,给与其18℃7 d和10℃7 d的低温刺激后使用CM-H2DCFDA探针染色,通过流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量;JC-1探针染色,流式细胞仪检测低温处理后PGC-1α敲降的细胞线粒体膜电位的变化。研究表明,在低温刺激下,PGC-1α基因未敲降的ZF4细胞内ROS含量升高,线粒体膜电位下降;而在PGC-1α基因敲降的ZF4细胞内,ROS含量在前者的水平上进一步升高,线粒体膜电位的下降也加剧,故PGC-1α在ZF4细胞冷应激过程中对细胞起到保护作用,能维持细胞内ROS含量和线粒体膜电位水平。本研究对PGC-1α基因在斑马鱼ZF4细胞冷应激过程中所起的功能进行初步探究,为鱼类在低温下的适应性研究提供依据。
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