沉默GDF15基因表达对高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和氧化应激的影响

作者：郭海燕^*; 邢志华; 王丽丽; 解菊芬

来源：郑州大学学报(医学版), 2020, 55(03): 368-373.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2019.12.051

• 肾小管上皮细胞
• 生长分化因子15
• 细胞凋亡
• 氧化应激
• Nrf2/HO-1信号通路

目的:探讨沉默生长分化因子15(GDF15)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2凋亡和氧化应激的影响及作用机制。方法:采用Western blot法检测16例糖尿病肾病(DN)患者和正常肾组织中GDF15蛋白表达水平。转染GDF15小干扰RNA(si-GDF15)、无义阴性序列(si-NC)至HK-2细胞,Western blot法检测细胞中GDF15蛋白水平(验证转染效果)。HK-2细胞分为对照组、高糖组、si-GDF15+高糖组、si-NC+高糖组,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测各组细胞中活性氧簇(ROS)含量,酶联免疫吸附法检测各组细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,Western blot法检测各组细胞中Bcl-2、Bax、细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平。结果:与正常肾组织比较,DN患者肾组织中GDF15蛋白表达水平升高(P<0.001)。与对照组比较,高糖组HK-2细胞凋亡率、细胞中Bax、HO-1和细胞核Nrf2蛋白、MDA以及ROS水平升高(P<0.001),细胞中Bcl-2和细胞质Nrf2蛋白水平、SOD和GSH-Px水平降低(P<0.001)。与si-NC+高糖组比较,si-GDF15+高糖组HK-2细胞凋亡率、细胞中Bax和细胞质Nrf2蛋白、MDA及ROS水平降低(P<0.001),细胞中Bcl-2、HO-1和细胞核Nrf2蛋白水平、SOD和GSH-Px水平升高(P<0.001)。结论:沉默GDF15基因表达可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2凋亡和氧化应激,其作用机制与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。

• 单位
  山西省汾阳医院; 山西医科大学汾阳学院