PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR鉴别检测方法的建立及应用

作者：高艺祥; 王金凤; 张倩; 孙晓霞; 刘立兵; 顾文源; 马宏伟; 马增军^*; 韩庆安^*; 王建昌^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(09): 1752-1763.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.09.03

• PCV2
• PCV3
• PCV4
• 三重荧光PCR

根据猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)、猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)和猪圆环病毒4型(porcine circovirus 4,PCV4)保守区域基因序列合成特异性的引物和TaqMan探针，通过优化反应条件，建立了一种可同时快速高效鉴别检测PCV2、PCV3和PCV4的三重荧光PCR方法。结果显示，所建立的三重荧光PCR方法仅对PCV2、PCV3和PCV4出现阳性扩增，与猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪支原体肺炎(M.hyo)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪常见病原无交叉反应；对PCV2、PCV3和PCV4的最低检出限分别为1.69×101,1.38×102,1.42×102拷贝；组内和组间试验变异系数均小于1.6%,重复性好。进一步应用所建立的PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR方法对263份猪临床样品进行检测，结果检出168份PCV2阳性(阳性率为63.88%),35份PCV3阳性(阳性率为13.31%),21份PCV4阳性(阳性率为7.98%),其中PCV2/PCV3/PCV4共感染3份(阳性率为1.14%),检测结果与单重荧光PCR方法一致。本研究所建立的PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR方法可以有效的实现对PCV2、PCV3和PCV4的同时快速检测。

• 单位
  动物科技学院; 河北科技师范学院